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        細胞分離實驗

        細胞分離實驗

        簡要描述:
        細胞分離實驗:實驗室通過檢測兩個細胞分開,或者是將細胞從基質上移開所需的力量,推算細胞的粘附性

        更新時間:2026-03-20

        訪問量:2023

        廠商性質:其他

        細胞分離實驗(組織→單細胞懸液)

        用途:從組織(血管、肝臟、腫瘤、動脈粥樣硬化斑塊、血液)中分離出活的單細胞,用于流式、培養、分選。

        一、試劑耗材

        • PBS(預冷)

        • 組z消化液:膠原酶 II / IV(常用 0.1%–0.2%)

          或 膠原酶 + 胰m混合消化液

        • 細胞篩網:70 μm 或 40 μm

        • 離心管、培養皿、剪刀、鑷子

        • 含血清培養基(終止消化)

        二、標準實驗流程

        1. 取材

        1. 無菌條件下取出組織。

        2. 冷 PBS沖洗,洗掉血污、脂肪、結締組織。

        3. 剪成 1 mm3 左右小碎塊

        2. 消化(最關鍵)

        把碎組織轉入離心管,加入預熱消化液
        放入 37℃水浴 消化:
        • 一般組織:30–60 min

        • 疏松組織:20 min

        • 致密組織(斑塊、動脈):1–2 h

        期間每隔 5–10 分鐘 輕輕吹打 / 顛倒 一次。

        3. 終止消化

        加入2–3 倍體積 含 10% 血清的完q培養基,終止消化(血清抑制酶)。

        4. 過濾去殘渣

        用吸管輕輕吹打后,過 70 μm 細胞篩
        去掉未消化的組織塊,只留單細胞懸液。

        5. 離心

        • 轉速:1000 rpm(≈6000 g)

        • 時間:5–8 min

          棄上清。

        6. 重懸 & 計數



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