乳腺癌動(dòng)物模型構(gòu)建

乳腺癌動(dòng)物模型構(gòu)建是實(shí)驗(yàn)組成之一，該實(shí)驗(yàn)由從事動(dòng)物實(shí)驗(yàn)專業(yè)，經(jīng)驗(yàn)豐富的人員進(jìn)行操作。

乳腺癌動(dòng)物模型構(gòu)件根據(jù)腫瘤發(fā)生原理，主要分為四種：

1. 自發(fā)型乳腺癌動(dòng)物模型（很少使用）

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物未經(jīng)任何有意識(shí)的人工處理，自然發(fā)生乳腺癌。多采用近交系小鼠，如C3H、SHN小鼠，生長(zhǎng)到一定年齡便自然發(fā)生乳腺癌腫瘤。此動(dòng)物模型更貼近人類腫瘤的發(fā)展，但構(gòu)建時(shí)間長(zhǎng)，誤差大，一般不建議使用等。

2. 誘發(fā)型乳腺癌動(dòng)物模型（較少使用）

使用化學(xué)物質(zhì)、物理、生物因素通過經(jīng)口、涂抹、注射等方法應(yīng)用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，使之發(fā)生乳腺癌。常見化學(xué)誘導(dǎo)方式是以（DMBA）和甲基亞硝酸基脲（MNU）為誘導(dǎo)劑誘發(fā)乳腺癌。

這種方法誘發(fā)成瘤率較高，但誘癌過程較長(zhǎng)，個(gè)體差異較大，不易同時(shí)獲得病程或者腫瘤大小均一的動(dòng)物模型，不利于應(yīng)用于抗腫瘤藥物的篩選研究。

以DMBA誘導(dǎo)大鼠乳腺癌模型為例：

取7周齡的健康雌性SD，根據(jù)體重將80mg/kg DMBA稀釋在0.5ml玉米油中，灌胃一次，12周后，可建立乳腺癌病變動(dòng)物模型。

3. 移植型乳腺癌動(dòng)物模型（易構(gòu)建）

定義：將人體或者其它種屬的動(dòng)物腫瘤組織或者細(xì)胞移植到免疫缺陷動(dòng)物身上使其生長(zhǎng)成腫瘤的動(dòng)物模型。

優(yōu)點(diǎn)：周期短，成本低，個(gè)體差異小，無自發(fā)緩解，成瘤率高等，目前實(shí)驗(yàn)室應(yīng)用非常多。

分類：

1. 根據(jù)移植對(duì)象可分為腫瘤組織接種、組織塊懸液注射、細(xì)胞懸液注射；

2. 根據(jù)移植物來源可分為同種移植和異種移植，其中異種移植需移植于免疫缺陷小鼠中，常用的是T細(xì)胞免疫功能缺陷的裸鼠或者T、B細(xì)胞免疫功能嚴(yán)重缺陷的嚴(yán)重聯(lián)合免疫缺陷(D)小鼠；

3. 根據(jù)移植部位可分為原位移植和異位移植，其中異位移植按照實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟煌煞譃槠は乱浦病z測(cè)肺轉(zhuǎn)移的尾靜脈注射、檢測(cè)骨和腦轉(zhuǎn)移的左心室注射等。

4. 轉(zhuǎn)基因型乳腺癌動(dòng)物模型（根據(jù)研究需要選擇）  定義：主要是利用基因編輯技術(shù)如CRISPR/Cas9進(jìn)行敲除或插入特定基因，從而誘發(fā)動(dòng)物產(chǎn)生腫瘤的模型。此模型具有穩(wěn)定的高發(fā)病率，便于觀察，已成為研究乳腺癌發(fā)病機(jī)理的良好的動(dòng)物模型。目前研究較多的是乳腺特異的啟動(dòng)子，如在鼠乳腺腫瘤病毒長(zhǎng)末端重復(fù)啟動(dòng)子（MMTV-LTR）的作用下表達(dá)癌基因。 MMTV是導(dǎo)致小鼠乳腺腫瘤的重要病毒，而是利用其病毒組織特異啟動(dòng)子及增強(qiáng)子功能非（致癌特性），介導(dǎo)癌基因ERBB2、PyMT、Wnt-1在小鼠乳腺高表達(dá)而發(fā)生乳腺癌。除外常用的有：抑癌基因Tp53敲除小鼠、乳腺癌抑制基因(BRCA)敲除小鼠等。以MMTV-PyMT轉(zhuǎn)基因乳腺癌模型為例，乳腺癌相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子Runx1隨著病程發(fā)展而表達(dá)上升。