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        細(xì)胞克隆

        細(xì)胞克隆

        簡要描述:
        細(xì)胞克隆:軟瓊脂克隆,克隆形成率反映細(xì)胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀。細(xì)胞包克隆化其他方法 1.稀釋鋪板方法 2.飼養(yǎng)層克隆法 3.毛細(xì)管克隆法 4.熒光激活分選法。

        更新時間:2026-03-20

        訪問量:2631

        廠商性質(zhì):其他

        軟瓊脂克隆:克隆形成率反映細(xì)胞群體依賴性和增殖能力兩個重要性狀
        實驗步驟
        1.獲取樣本,培養(yǎng)細(xì)胞,
        2.調(diào)整細(xì)胞懸液密度為1x103個/ml細(xì)胞。
        3.制備底層瓊脂,*溶化的5%瓊脂和37*C左右預(yù)溫的新鮮*培養(yǎng)液以1: 9比例在40^C均勻混合,加入培養(yǎng)皿(直
        徑60mm)中,每皿含0.5%瓊脂培養(yǎng)基2ml,室溫下瓊脂*凝固。
        4.制備上層瓊脂,37C密度每皿含200個的細(xì)胞懸液1.5m移入小燒杯中,加入40C、5%瓊脂等體積混勻,即成0.25%半固
        體瓊脂培養(yǎng)基。配好的半固體瓊脂培養(yǎng)基立即加入鋪有底層瓊脂的培養(yǎng)皿中,室溫下瓊脂凝固。37C、5%CO2靜置培養(yǎng)2-
        3周。
        5.當(dāng)培養(yǎng)皿中出現(xiàn)肉眼可見克隆時,終止培養(yǎng),棄去培養(yǎng)液,PBS液小心浸洗2次,空氣干燥。甲醇固定15分鐘,棄甲醇后
        空氣干燥。用Giemsa染液染色10分鐘,流水緩慢洗去染液,空氣干燥。

        實驗周期及交付標(biāo)準(zhǔn)
        1.實驗周期: 1-2周
        2.交付標(biāo)準(zhǔn):克隆形成圖片、計數(shù)結(jié)果、柱狀圖、實驗報告(實驗步驟、試劑、儀器等)
        細(xì)胞包克隆化其他方法
        1.稀釋鋪板方法
        2.飼養(yǎng)層克隆法
        3.毛細(xì)管克隆法
        4.熒光激活分選法


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