單細胞測序技術服務
一、核心價值:從 “群體模糊" 到 “個體精準"
傳統 Bulk 測序:把組織中所有細胞混在一起,只能得到基因表達 “平均值",掩蓋細胞差異(如腫瘤中少量耐藥細胞、組織中稀有干細胞)。
單細胞測序:分離單個細胞,獨立標記、建庫、測序,精準解析每個細胞的分子特征,揭示細胞亞型、發育軌跡、微環境互作等。
二、單細胞測序技術服務主流技術類型(按檢測對象)
scRNA-seq(單細胞轉錄組):測 mRNA,分析基因表達譜,用于細胞分群、差異基因、發育軌跡、細胞通訊。
snRNA-seq(單細胞核轉錄組):提細胞核 RNA,適配凍存 / FFPE / 難解離組織(如神經、纖維化組織),避免完整細胞解離損傷。
scATAC-seq(單細胞染色質可及性):測開放染色質,研究基因表達調控(順式作用元件、轉錄因子結合)。
scWGS/scWES(單細胞全基因組 / 外顯子):測 DNA,找單細胞水平突變、CNV,用于腫瘤異質性、胚胎發育、嵌合體研究。
多組學聯合:如 scRNA+scATAC、scRNA + 蛋白,多維解析細胞狀態。
三、實驗流程(以 10X Genomics scRNA-seq 為例)
1. 樣本制備:組織酶解 / 機械解離→單細胞懸液→質控(活性 > 80%,無團聚)。
2. 細胞捕獲與標記:微流控將單個細胞 + 帶條形碼(Cell Barcode+UMI)的微珠包裹進油包水液滴;每個細胞獲唯yi Cell Barcode,每條 RNA 獲唯yi UMI(防擴增偏差)。
3. 裂解與逆轉錄:液滴內裂解細胞→mRNA 釋放→逆轉錄為 cDNA(帶 Barcode/UMI)。
4. 文庫構建:cDNA 擴增→片段化→加測序接頭→建庫。
5. 高通量測序:Illumina 平臺測序,讀長含 Barcode、UMI、基因序列。
6. 數據分析:
質控:過濾低質量細胞 / 基因。
降維聚類:PCA→t-SNE/UMAP→細胞分群。
注釋:Marker 基因匹配已知細胞類型。
高級分析:差異基因、GO/KEGG 富集、發育軌跡(Monocle)、細胞通訊(CellPhoneDB)。
四、應用場景
腫瘤研究:解析腫瘤異質性,找耐藥 / 轉移亞群、腫瘤干細胞;分析免疫微環境(TME),指導免疫治療。
發育生物學:繪制胚胎 / 器官發育細胞譜系圖譜,追蹤分化軌跡,揭示關鍵調控基因。
神經科學:解析神經元亞型、腦區細胞異質性,研究神經退行性疾病(如阿爾茨海默病)機制。
免疫學:刻畫免疫細胞(T/B/ 巨噬細胞)亞群、活化狀態、受體多樣性,研究感染 / 自身免疫病。





